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2021-11-04
樣品制備方法細胞培養(yǎng)物上清液將培養(yǎng)基移至離心管,4℃,1,500rpm離心10分鐘。立即進行上清液的分裝(血清)并在-80℃下保存樣品。盡可能減少反復凍融次數(shù)細胞提取物將組織培養(yǎng)板放置在冰上吸出培養(yǎng)基并用預冷PBS輕輕洗滌細胞一次吸出PBS,加入100mm培養(yǎng)板加入0.5ml*提取緩沖液收集細胞至在傾斜板中,然后移至經(jīng)過預冷的離心管中。短暫渦旋后在冰上孵育15-30分鐘在4℃下13,000xrpm離心10分鐘,沉淀不溶性內(nèi)容物將上清液(這里是指可溶性細胞提取物)分裝至預冷的離...2021-10-28
細胞培養(yǎng)基的配制細胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等,其中牛血清是常用的血清,分為胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清,價格昂貴。新生小牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清,如廠家能做到這一點,新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。如小牛出生后已哺乳,從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì),其質(zhì)量明顯不如前兩種。血清的質(zhì)量,種類及使用的濃度都有可能影響細胞的生長,而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同...2021-10-21
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人T細胞免疫球蛋白粘蛋白分子3(TIM-3)的含量。有效期:6個月保存條件:2-8℃本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人T細胞免疫球蛋白粘蛋白分子3(TIM-3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色...2021-10-14
Hyclone胎牛血清使用方法:在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,常使用的Hyclone澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的HycloneFBS或者20%的Hyclone胎牛血清,要根據(jù)具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度。HyClone胎牛血清保存方法:(1)長期保存的血清必須儲存于-20℃-7...2021-10-09
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠纖溶酶原(Plg)的含量。有效期:6個月保存條件:2-8℃本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠纖溶酶原(Plg)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠纖溶酶原(Plg)...2021-09-23
1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保存抗原很重要,還有有的包被原可能不是蛋白,對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被,我把方法簡要的列出如下:①親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,開蓋置冰箱過夜或冷風吹干,待酒精揮發(fā)后,讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必...2021-09-16
在一般的概念里,ELISA技術(shù)的可操作性強,不需復雜設(shè)備,甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果,便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對質(zhì)量控制意識的加強,盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動強度等觀念的不斷改進,解決ELISA技術(shù)中加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的系統(tǒng)誤差問題及高效率運作問題導致了自動化概念的形成。ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的科學地、有機地、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動化ELISA技術(shù)的理論基礎(chǔ)。在自動化...