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2025-05-12
一、凍存原理：對抗低溫?fù)p傷的三大機(jī)制?1.?冷凍保護(hù)劑：細(xì)胞的“生命盾-牌”?作用機(jī)理?DMSO（二甲基亞砜）或甘油作為滲透性保護(hù)劑，穿透細(xì)胞膜后：降低細(xì)胞內(nèi)水分冰點，抑制冰晶形成與水分子形成氫鍵，延緩結(jié)晶速率穩(wěn)定膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，防止低溫破裂濃度選擇?常規(guī)使用5%-10%濃度，高濃度（如20%）可能引發(fā)毒性，需平衡保護(hù)效果與細(xì)胞損傷。2.?程序降溫：精準(zhǔn)控制冰晶生長?相變危險區(qū)?（-15℃至-60℃）：此階段冰晶最易形成，需以?1℃/min?速率緩慢降溫，避免大冰晶刺穿細(xì)胞器。玻...2025-05-07
一、細(xì)胞分離液的工作原理?細(xì)胞分離液是一種基于密度梯度離心原理設(shè)計的介質(zhì)，常用成分包括聚蔗糖（如Ficoll）或硅膠顆粒（如Percoll）。不同細(xì)胞因大小、密度和沉降系數(shù)差異，在離心過程中分層，從而被精準(zhǔn)分離。例如：外周血單個核細(xì)胞（PBMC）?可通過Ficoll分離液與紅細(xì)胞、粒細(xì)胞區(qū)分；腫瘤細(xì)胞?可通過特殊配方的分離液從組織碎片中富集。二、細(xì)胞分離液的標(biāo)準(zhǔn)操作流程?1.樣本準(zhǔn)備?血液樣本需抗凝處理（如EDTA抗凝），組織樣本需機(jī)械破碎或酶消化成單細(xì)胞懸液。過濾去除大顆粒...2025-04-21
一、唾液樣本采集規(guī)范空腹采集，避免進(jìn)食后30分鐘內(nèi)取樣（唾液淀粉酶含量升高干擾檢測）使用無菌唾液采集管，避免口腔黏膜細(xì)胞混入處理流程樣本收集后立即于-70℃速凍1小時，冰上融化后10000rpm離心10分鐘取上清短期保存（二、尿液樣本采集要求無菌管收集中段尿，避免微生物污染樣本體積需≥50μL（適配微量ELISA試劑盒）預(yù)處理要點2000-3000rpm離心20分鐘，取上清檢測；若沉淀復(fù)現(xiàn)需二次離心高濃度尿素樣本建議1:5PBS稀釋后檢測（降低基質(zhì)效應(yīng)）三、糞便樣本均質(zhì)化處理...2025-04-14
一、核糖體的定義與結(jié)構(gòu)?核糖體?是細(xì)胞中負(fù)責(zé)?蛋白質(zhì)合成?的分子機(jī)器，由核糖體RNA（rRNA）和多種蛋白質(zhì)組裝而成。分類?：原核生物核糖體?（70S）：由30S小亞基（16SrRNA+21種蛋白）和50S大亞基（23S/5SrRNA+34種蛋白）組成。真核生物核糖體?（80S）：包含40S小亞基（18SrRNA）和60S大亞基（28S/5.8S/5SrRNA）。結(jié)構(gòu)特征?：功能活性位點?：包括解碼中心（識別mRNA密碼子）、肽基轉(zhuǎn)移酶中心（催化肽鍵形成）及新生肽鏈通道。動態(tài)...2025-04-07
一、定義與分子特性白細(xì)胞介素6（IL-6）?是一種由184個氨基酸組成的糖蛋白，分子量約22-28kDa，其基因位于人類第7號染色體，通過四螺旋結(jié)構(gòu)傳遞信號?。IL-6主要由免疫細(xì)胞（如單核/巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞）和非免疫細(xì)胞（如內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞）分泌，是連接先天免疫與適應(yīng)性免疫的“樞紐型”細(xì)胞因子?。二、生物學(xué)功能與信號傳導(dǎo)1.?核心生物學(xué)功能??免疫調(diào)節(jié)?：激活B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，促進(jìn)抗體生成；調(diào)控Th17/Treg細(xì)胞平衡，維持免疫穩(wěn)態(tài)?。?炎癥放大?：誘導(dǎo)肝臟合成C反應(yīng)...2025-03-26
一、PGE2的定義與分子特性1.化學(xué)本質(zhì)結(jié)構(gòu)：PGE2屬于類花生酸家族，由20碳脂肪酸（花生四烯酸）衍生而來，核心結(jié)構(gòu)包含一個五元環(huán)和兩條側(cè)鏈。合成路徑：關(guān)鍵酶：環(huán)氧合酶（COX-1/COX-2）、前列腺素E合成酶（PGES）。代謝路徑：細(xì)胞膜磷脂→磷脂酶A2→花生四烯酸→COX→PGH2→PGES→PGE2。2.動態(tài)調(diào)控特點半衰期極短：僅約5分鐘，需持續(xù)合成以維持作用。局部釋放：僅在合成部位附近發(fā)揮作用，不進(jìn)入全身循環(huán)。二、PGE2的核心生物學(xué)功能1.炎癥與免疫調(diào)節(jié)促炎作用...2025-03-18
?一、溶酶體的基本概念1.定義溶酶體是存在于真核細(xì)胞中的一種膜包裹的細(xì)胞器，其核心功能是通過內(nèi)部儲存的?60多種酸性水解酶?（如蛋白酶、脂酶、核酸酶等），分解蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等生物大分子，同時回收小分子物質(zhì)供細(xì)胞再利用。?2.發(fā)現(xiàn)歷史?1955年?：比利時科學(xué)家ChristiandeDuve首-次通過電鏡發(fā)現(xiàn)溶酶體，并因此獲得1974年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。關(guān)鍵突破?：溶酶體酶的發(fā)現(xiàn)揭示了細(xì)胞“自我清理”的機(jī)制，顛-覆了人們對細(xì)胞代謝的認(rèn)知。3.結(jié)構(gòu)組成?膜結(jié)構(gòu)?：溶酶體膜...